泰安市泰山区红豆杉繁育推广中心(泰安市国山紫科红豆杉种植农民专业合作社)
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简述曼地亚红豆杉配制培养基母液及细胞培养
曼地亚红豆杉因为其含有巨大的生物量,被各个行业所重视,其中最为著名的就是可以提炼紫杉醇。为此,各个国家都在对紫杉醇做研究:
首先配置培养基母液:
(1)就大量元索而言,一般配成使用浓度的10-20倍,按一定倍数分别称量并分别用蒸馏水溶解后混合在一起,最后加蒸馏水定容。
(2)微最元索因用最小,为称量方便及精确起见常配成100倍或1000倍的母液,即每种化合物的量加大100倍或1000倍,逐个溶解并混合在一起。注意微量元素中的铁盐足单独配制的,由硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠(EDTA*Na2)溶于1L水中配成,每配培养基加此铁盐母液5mL。
(3)有机物质主要指氨基酸和维生素物质,分别称量并用容量瓶配成所需浓度用时按培养基配方中要求的量分别加入。
(4)生长调节物质:一般配成0.1-1.0mg/mL生长素类2,4-0和NAA等在配制时先按要求的浓度称好药品,置于小烧杯中,用1-2mL,0.1mol/L NaOH溶解,再加蒸馏水稀释至所需浓度。配制细胞分裂素类物质如6-BA等,先用少量0.5mol/L或1mol/L盐酸来溶解,然后加蒸馏水至所需量。
然后,研究人员对红豆杉进行细胞培养,到目前为止,从红豆杉植物及细胞培养物中至少已分离得到近400种化合物,其中大多数为紫杉烷类化合物。从红豆杉细胞培养物中至少已鉴定到30种以上的化学成分,其中绝大多数句天然红豆杉的化学成分相同成相似,证明了离体培养的细胞具有合成与天然植物一样的化合物的“全能性”对红豆杉培养细胞中化学成分进行研究,不仅可以帮助人们从中筛选到一些抗癌活性与紫杉醇相似,但毒副作用更低.来源更丰富的化合物,同时还可帮助人们深人地对紫杉醇等化合物进行生物合成途径的探讨,为最终通过基因工程手段来调控化合物的合成打下基础。http://www.sdtshds.com/
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